超滤离心管常见问题三(实验操作) 1. Amicon Ultra超滤管的膜会因为离心时间过长而变干么? 不会,因为Amicon Ultra有死体积设计,总会有溶液残留在滤管中。 2. Amicon Ultrar超滤管可以用酒精消毒灭菌么? Amicon Ultra装置与70%乙醇是兼容的,但是对灭菌处理的具体方法没有做相关的测试,所以无法提供更进一步的参考信息。 3. Amicon Ultra超滤装置是否可以用于高压灭菌? 不可以,Amicon Ultra都是采用热封设计,不可以用高压高温灭菌。 4. Millipore是否提供无热源的超滤装置? Millipore提供的超滤装置均非无热源的,即使是无菌装置也可能包含热源。 5. Amicon Ultra超滤管是否不含RNA酶? 不保证超滤管不包含RNA酶,建议用0.1% DEPC在37度浸泡2小时,以完全 灭活RNA酶。残留的DEPC可以用超纯水洗涤除去。 6. 说明书中推荐在室温下进行离心,考虑到蛋白的稳定性,是否可以在4℃进行离心? 可以,但是低温会增加蛋白样品的粘性,导致流速减慢,建议可将离心时间延长到原来的 1.5倍。 7. 如何对超滤管进行去除内毒素的处理? 超滤管是没有经过去内毒素处理的,同时由于内毒素通常以多聚体的形式存在,大小在10-1000KD之间不等,在超滤的过程中是无法去除的。可在实验前通过先用 0.5M NaOH预清洗,随后用Milli-Q水/缓冲液buffer清洗的步骤去除大部分内毒素。 8. 处理后样品怎样收集? 两种方式:移液枪转移和反转离心 (1) 对于15 mL和4 mL的超滤管,可以直接通过移液枪收集处理后样品 (2) 对于0.5 mL的超滤管,可以通过反转离心的方式收集处理后样品:将有浓缩样品的超滤管(内管)倒置于新的离心管中后,低速离心(1,000 g)后将样品重新离心到新离心管中。 备注:以上信息仅供参考,具体信息说明及操作以厂家说明书为准。 |
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